產(chǎn)品中心您現(xiàn)在的位置:首頁 > 產(chǎn)品展示 > 細(xì)胞生物學(xué) > 細(xì)胞株 > YZ-X1022WT 9-7人常染色體多囊腎病上皮細(xì)胞

              WT 9-7人常染色體多囊腎病上皮細(xì)胞

              更新時間:2025-04-09

              簡要描述:

              細(xì)胞名稱:WT 9-7人常染色體多囊腎病上皮細(xì)胞
              種屬來源:人
              性別年齡:女性,年齡未知
              組織來源:腎
              生長特性:貼壁生長
              細(xì)胞形態(tài):上皮樣
              細(xì)胞規(guī)格:1 X 106cells/T25或1 mL凍存管
              培養(yǎng)條件:DMEM + 10% fetal bovine serum (FBS)
              37 ℃, 5% CO2

              型號:YZ-X1022點擊量:339
              品牌研尊生物貨號YZ-X1022
              規(guī)格1 X 106cells/T25或1 mL凍存管供貨周期現(xiàn)貨
              主要用途科研實驗

               

              WT 9-7人常染色體多囊腎病上皮細(xì)胞

              種屬來源:

              性別年齡:女性,年齡未知

              組織來源:

              生長特性:貼壁生長

              細(xì)胞形態(tài):上皮樣

              細(xì)胞規(guī)格:1 X 106cells/T251 mL凍存管

              培養(yǎng)條件:DMEM + 10% fetal bovine serum (FBS)

                        37 , 5% CO2

              凍存條件90% FBS + 10% DMSO

              傳代方法:1618傳代1-2天傳1

              細(xì)胞培養(yǎng)操作

              干冰運輸收到細(xì)胞后需立即轉(zhuǎn)入液氮保存、或者-80°C冰箱短期凍存、或者直接復(fù)蘇

              常溫運輸收到細(xì)胞后,請立即將細(xì)胞培養(yǎng)瓶從包裝盒中取出,并按照下方操作步驟進(jìn)行培養(yǎng)傳代

              細(xì)胞傳代細(xì)胞密度達(dá)80% - 90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)

              培養(yǎng)瓶中細(xì)胞操作步驟

               對于貼壁培養(yǎng)的細(xì)胞,寄送前,我們會將培養(yǎng)基充滿整個培養(yǎng)瓶,以減少產(chǎn)品運輸過程中貼壁細(xì)胞的脫落。

              1. 收到細(xì)胞后,請注意觀察是否有污染。將培養(yǎng)瓶置于倒置顯微鏡下仔細(xì)檢查是否渾濁、是否細(xì)菌污染。因為運輸過程中存在顛簸,且有些細(xì)胞對溫度變化也很敏感,可能存在一些細(xì)胞脫落漂浮的情況,這些細(xì)胞仍是活細(xì)胞,請勿丟棄,可離心富集后傳代使用。

              2. 對于貼壁細(xì)胞,在生物安全柜環(huán)境中,用真空泵去除培養(yǎng)瓶中多余的培養(yǎng)基,至剩余5-8mL 左右,隨后根據(jù)培養(yǎng)基選擇合適的CO2含量的37恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng),擰松瓶蓋。如果細(xì)胞已經(jīng)長滿培養(yǎng)瓶,請立即傳代。

              3. 對于懸浮的細(xì)胞,在生物安全柜環(huán)境中,轉(zhuǎn)移培養(yǎng)瓶中的細(xì)胞至離心管,150 g 離心 5 分鐘,去除上清后,用5 mL培養(yǎng)基吹散細(xì)胞,轉(zhuǎn)移至新的培養(yǎng)瓶中,隨后置于合適的CO2含量的37恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

              凍存管細(xì)胞操作步驟

              注意: 為保證細(xì)胞的高活率,請收到產(chǎn)品后,立即解凍培養(yǎng)。

              1. 將凍存管置于37水浴中來回晃動,迅速解凍。為避免污染,確保凍存管口置于水面之上。解凍需迅速,大約1分鐘。

              2. 一旦凍存管中液體融化后,立即取出,采用酒精噴拭凍存管表面。從此步開始,后續(xù)操作須在生物安全柜中完成。

              3. 將凍存管中的液體轉(zhuǎn)移到含有5mLwan全培養(yǎng)基的離心管中,150 g 離心 5 分鐘,用真空泵去除上清。

              4. wan全培養(yǎng)基重新懸浮細(xì)胞并轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶中。為保證細(xì)胞復(fù)蘇的存活率,請將培養(yǎng)基在37水浴預(yù)熱后使用。

              5. 將細(xì)胞置于含有合適CO2的37恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

              貼壁細(xì)胞傳代培養(yǎng)

              1. 吸取并棄掉培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)基,加入PBS潤洗一次。

              2. 加入1 mL 0.25 (w/v) Trypsin-EDTA 溶液,并置于37℃培養(yǎng)箱中孵育,直至細(xì)胞從壁上脫落分離。此過程大約需要3-5分鐘。

              3. 加入2mLwan全培養(yǎng)基中和胰蛋白酶,并輕輕吹打?qū)⒓?xì)胞從培養(yǎng)瓶表面吹落,并使細(xì)胞分散。

              4. 將細(xì)胞懸液收集到15mL離心管里,150 g 離心 5 分鐘,用真空泵去除上清。取適量的培養(yǎng)基將細(xì)胞重懸,轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。

              懸浮細(xì)胞傳代可參考以下方法:

              一、直接傳代法

              1. 待懸浮細(xì)胞長滿至 80%~90%(細(xì)胞懸液變黃),即可傳代;

              2. 吸管吸棄細(xì)胞懸液 1 / 2~1 / 3;

              3. 加入適量的新鮮培養(yǎng)基,繼續(xù)培養(yǎng)。

                 二、離心傳代法(在發(fā)現(xiàn)有細(xì)胞碎片的情況下)

              4. 將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi);

              5. 150 g 離心 5 min,棄去上層清液;

              6. 使用新鮮的培養(yǎng)基重懸細(xì)胞;

              7. 吸管吸取適量細(xì)胞懸液,裝入新的培養(yǎng)瓶,再加入適量的新鮮培養(yǎng)基,繼續(xù)培養(yǎng)。

              細(xì)胞凍存操作

              1. 1000rpm離心5分鐘去掉上清。加1 mL血清重懸細(xì)胞,根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入血清和DMSO,輕輕混勻DMSO終濃度為10%,細(xì)胞密度不低于1 x 106/mL,每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液,注意凍存管做好標(biāo)識

              2. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80°C冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。

               WT 9-7人常染色體多囊腎病上皮細(xì)胞

              大鼠腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞

              人小膠質(zhì)細(xì)胞

              人食管鱗癌細(xì)胞

              人單核細(xì)胞白血病細(xì)胞

              人皮膚成纖維細(xì)胞永生化

              人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞

              倉鼠卵巢細(xì)胞亞株

              小鼠樹突狀瘤細(xì)胞

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