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              PK-1人胰腺導(dǎo)管腺癌細胞

              更新時間:2025-04-09

              簡要描述:

              細胞名稱: PK-1人胰腺導(dǎo)管腺癌細胞
              種屬來源: 人 性別年齡: 男性
              種屬來源: 胰腺生長特性: 貼壁生長細胞形態(tài): 不規(guī)則細胞樣
              更多細胞歡迎咨詢

              型號:YZ-X1088點擊量:472
              品牌研尊生物貨號YZ-X1088
              規(guī)格T25或1mL凍存管供貨周期現(xiàn)貨
              主要用途科研實驗

               

              PK-1人胰腺導(dǎo)管腺癌細胞

              產(chǎn)品信息

              細胞名稱: PK-1人胰腺導(dǎo)管腺癌細胞

              種屬來源:   

              性別年齡: 男性

              種屬來源:   胰腺

              生長特性: 貼壁生長

              細胞形態(tài):   不規(guī)則細胞樣

              細胞規(guī)格:  1 X 106cells/T251 mL凍存管

              培養(yǎng)條件:  RPMI1640 +10% fetal bovine serum

              37 , 5% CO2

              凍存條件:  90% FBS + 10% DMSO

              傳代方法:1:3傳代, 2-3天傳1

              細胞培養(yǎng)操作

              干冰運輸:收到細胞后需立即轉(zhuǎn)入液氮保存、或者-80°C冰箱短期凍存、或者直接復(fù)蘇

              常溫運輸:收到細胞后,請立即將細胞培養(yǎng)瓶從包裝盒中取出,并按照下方操作步驟進行培養(yǎng)傳代

              細胞傳代:細胞密度達80% - 90%,即可進行傳代培養(yǎng)

               

              培養(yǎng)瓶中細胞操作步驟

               對于貼壁培養(yǎng)的細胞,寄送前,我們會將培養(yǎng)基充滿整個培養(yǎng)瓶,以減少產(chǎn)品運輸過程中貼壁細胞的脫落。

              1. 收到細胞后,請注意觀察是否有污染。將培養(yǎng)瓶置于倒置顯微鏡下仔細檢查是否渾濁、是否細菌污染。因為運輸過程中存在顛簸,且有些細胞對溫度變化也很敏感,可能存在一些細胞脫落漂浮的情況,這些細胞仍是活細胞,請勿丟棄,可離心富集后傳代使用。

              2. 對于貼壁細胞,在生物安全柜環(huán)境中,用真空泵去除培養(yǎng)瓶中多余的培養(yǎng)基,至剩余5-8mL 左右,隨后根據(jù)培養(yǎng)基選擇合適的CO2含量的37恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng),擰松瓶蓋。如果細胞已經(jīng)長滿培養(yǎng)瓶,請立即傳代。

              3. 對于懸浮的細胞,在生物安全柜環(huán)境中,轉(zhuǎn)移培養(yǎng)瓶中的細胞至離心管,150 g 離心 5 分鐘,去除上清后,用5 mL培養(yǎng)基吹散細胞,轉(zhuǎn)移至新的培養(yǎng)瓶中,隨后置于合適的CO2含量的37恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

               

              凍存管細胞操作步驟

              注意: 為保證細胞的高活率,請收到產(chǎn)品后,立即解凍培養(yǎng)。

              1. 將凍存管置于37水浴中來回晃動,迅速解凍。為避免污染,確保凍存管口置于水面之上。解凍需迅速,大約1分鐘。

              2. 一旦凍存管中液體融化后,立即取出,采用酒精噴拭凍存管表面。從此步開始,后續(xù)操作須在生物安全柜中完成。

              3. 將凍存管中的液體轉(zhuǎn)移到含有5mL完培養(yǎng)基的離心管中,150 g 離心 5 分鐘,用真空泵去除上清。

              4. 用全培養(yǎng)基重新懸浮細胞并轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶中。為保證細胞復(fù)蘇的存活率,請將培養(yǎng)基在37水浴預(yù)熱后使用。

              5. 將細胞置于含有合適CO2的37恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

               

              貼壁細胞傳代培養(yǎng)

              1. 吸取并棄掉培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)基,加入PBS潤洗一次。

              2. 加入1 mL 0.25 (w/v) Trypsin-EDTA 溶液,并置于37℃培養(yǎng)箱中孵育,直至細胞從壁上脫落分離。此過程大約需要3-5分鐘。

              3. 加入2mL全培養(yǎng)基中和胰蛋白酶,并輕輕吹打?qū)⒓毎麖呐囵B(yǎng)瓶表面吹落,并使細胞分散。

              4. 將細胞懸液收集到15mL離心管里,150 g 離心 5 分鐘,用真空泵去除上清。取適量的培養(yǎng)基將細胞重懸,轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)。

              懸浮細胞傳代可參考以下方法:

               一、直接傳代法

                  1、待懸浮細胞長滿至 80%~90%(細胞懸液變黃),即可傳代;
                  2、用吸管吸棄細胞懸液 1 / 2~1 / 3;
                  3、加入適量的新鮮培養(yǎng)基,繼續(xù)培養(yǎng)。

               二、離心傳代法(在發(fā)現(xiàn)有細胞碎片的情況下)

                  1、將細胞懸液轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi);
                  2、150 g 離心 5 min,棄去上層清液;
                  3、使用新鮮的培養(yǎng)基重懸細胞;
                  4、吸管吸取適量細胞懸液,裝入新的培養(yǎng)瓶,再加入適量的新鮮培養(yǎng)基,繼續(xù)培養(yǎng)。

               

              細胞凍存操作

              1. 1000rpm離心5分鐘去掉上清。加1 mL血清重懸細胞,根據(jù)細胞數(shù)量加入血清和DMSO,輕輕混勻,    DMSO終濃度為10%,細胞密度不低于1 x 106/mL,每支凍存管凍存1mL細胞懸液,注意凍存管做好標識。

              2. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80°C冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。

               PK-1_人胰腺導(dǎo)管腺癌細胞

              人膀胱癌細胞

              人腎細胞腺癌細胞

              人膠質(zhì)母細胞瘤細胞

              人肺癌細胞

              人非小細胞肺癌細胞

              人結(jié)直腸癌紫杉醇耐藥株

              人膀胱癌細胞

              人胰腺導(dǎo)管細胞

              人乳腺癌細胞

              人黑色素瘤細胞

              人舌鱗癌細胞

              人膽囊癌細胞


               

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