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小鼠雜交瘤細(xì)胞LB3.1ATCCHB298 新品

更新時間:2025-11-23

簡要描述:

型號:點擊量:16
中文名稱:小鼠雜交瘤細(xì)胞LB3.1ATCCHB298英文名稱:LB31ATCCHB298
品牌: 雅吉生物產(chǎn)地: 上海
保存條件: 無血清凍存液純度規(guī)格: 99%
產(chǎn)品類別: 細(xì)胞 細(xì)胞系
貨號: YS1904用途范圍: 科研實驗
規(guī)格: T25是否進口:
組織來源: ATCC是否是腫瘤細(xì)胞: 咨詢客服
細(xì)胞形態(tài): 細(xì)胞系器官來源: ATCC
物種來源: 小鼠

產(chǎn)品名稱:小鼠雜交瘤細(xì)胞LB3.1ATCCHB298

傳代方法

次建議1:2傳代 

凍存條件

無血清凍存液(貨號:C7001

細(xì)胞描述

本庫的細(xì)胞僅用于科研工作,未經(jīng)許可不得用于其他目的,使用者不得將本庫細(xì)胞轉(zhuǎn)讓給第三者。 

培養(yǎng)備注

用無菌離心管收集瓶子培養(yǎng)基,留作過渡培養(yǎng)

小鼠雜交瘤細(xì)胞LB3.1ATCCHB298到貨后處理

細(xì)胞在培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)至良好狀態(tài)后灌滿培養(yǎng)液并封好瓶口是細(xì)胞運輸?shù)霓k法。收到細(xì)胞回到自己的實驗室后,先打開外包裝,用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超凈臺內(nèi),嚴(yán)格無菌操作培養(yǎng)箱靜置2-4小時。鏡下觀察:未超過80%匯合度時,可將瓶裝的培養(yǎng)液收集至離心管中,加入6ml培養(yǎng)基,放入37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng);超過80%匯合度時,根據(jù)情況傳代或者凍存,具體操作見細(xì)胞培養(yǎng)步驟。注意發(fā)貨的是密封培養(yǎng)瓶的話,放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)記得培養(yǎng)瓶蓋子擰松,傳代后建議一瓶用原瓶里面的培養(yǎng)基,另外一瓶用自己配的培養(yǎng)基

小鼠雜交瘤細(xì)胞LB3.1ATCCHB298培養(yǎng)步驟

一、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中,培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。

二、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。

a)、對于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:

1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。

2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上10%血清的培養(yǎng)基終止消化。

3.輕輕吹打細(xì)胞,脫落后吸出,在1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。

4. 按5-6ml/瓶補加培養(yǎng)液,將細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。

b)、對于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:

QQ圖片20240529141609.png

方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄上清液,補加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。

方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。

PS:若客戶收到2ml小管細(xì)胞,收到細(xì)胞后,用75%酒精噴灑整個管子消毒后放到超凈臺或安全柜內(nèi),嚴(yán)格無菌操作;將小管細(xì)胞轉(zhuǎn)移至T25培養(yǎng)瓶或6cm培養(yǎng)皿,加入5ml左右培養(yǎng)基混勻,放入培養(yǎng)箱過夜培養(yǎng)后查看細(xì)胞密度:若密度未超過80%,換液繼續(xù)培養(yǎng),視情況傳代或者凍存。若密度超過80%,可直接進行傳代(方法同上)。

三、細(xì)胞凍存:注:無血清凍存液凍存細(xì)胞的方法請參考我司貨號:C7001

1細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時,棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,用PBS清洗細(xì)胞一次;

2添加0.25%消化液約1ml至培養(yǎng)瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后加入培養(yǎng)液終止消化,輕輕吹打細(xì)胞使之脫落,然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中,1000rpm離心5min;

3用適量的凍存液重懸細(xì)胞,并放置于凍存管中;

4先將細(xì)胞凍存管放置于-20℃ 1.5h,然后將其移入-80℃

小鼠雜交瘤細(xì)胞LB3.1ATCCHB298部分相關(guān)細(xì)胞如下:

細(xì)胞消化的小技巧

不一定要一次把所有細(xì)胞都要消化下來!


晃動培養(yǎng)盤并在顯微鏡下用肉眼觀察,只要70~80%細(xì)胞都收縮了或超過適合消化時間,就該終止消化反應(yīng),如果細(xì)胞量夠即可進行后續(xù)傳代或?qū)嶒灢襟E;如果細(xì)胞量不夠,則可視情況用不含鈣、鎂離子的清洗仍貼壁的細(xì)胞,再進行一次消化反應(yīng)。


▲ 消化不下來的細(xì)胞(黃)請視情況決定是否再消化一次。


不一定要吹打成單細(xì)胞懸液!


一般細(xì)胞脫離培養(yǎng)底物、并經(jīng)過5~10次輕柔吹打后,會在細(xì)胞懸液里形成小規(guī)模聚集(約5~10顆細(xì)胞),所以不需要過度延長消化時間想讓細(xì)胞分離成單細(xì)胞懸液。


消化效果不佳,先提升消化液濃度、再加長作用時間!


當(dāng)你選定了一種消化方式 (物理機械法除外),發(fā)現(xiàn)效果不佳,首先應(yīng)考慮提高EDTA或濃度,效果再不佳才加長消化的作用時間,避免細(xì)胞長時間浸泡在消化液中造成的細(xì)胞膜損傷。


(一般消化液使用:0.02%~0.04% EDTA作用5-20分鐘;0.2~0.5% 作用1~5分鐘)


結(jié)語


細(xì)胞消化 ,是一個看似很簡單,但是有很多技術(shù)含量的步驟。消化好壞、是否污染、有無受傷,都在這短短的五六分鐘里決定。


當(dāng)我們已經(jīng)可以順利操作細(xì)胞培養(yǎng)實驗,接下來要思考的,就是如何讓細(xì)胞長得更健康、更均一、做出來的實驗才會更。























YS1904LB31ATCCHB298小鼠雜交瘤細(xì)胞LB3.1ATCCHB298

YS1905MOVAS1小鼠主動脈血管平滑肌細(xì)胞MOVAS1

YS1906TC1crl2493小鼠淋巴母細(xì)胞b淋巴細(xì)胞TC1crl2493

YS1907RAW2647SEAP/LUC小鼠白血病細(xì)胞RAW264.7SEAP/LUC

YS1908NSC34小鼠神經(jīng)元細(xì)胞NSC34

YS1909CTLA4Ig24中國倉鼠卵巢細(xì)胞CTLA4Ig24

YS1910Lec1倉鼠卵巢細(xì)胞Lec1

YS1911OK負(fù)鼠腎上皮細(xì)胞OK

YS1912AB22小鼠胚胎干細(xì)胞AB2.2

YS19132666小鼠胰腺腺泡癌細(xì)胞2666

YS1914C1498小鼠急性骨髓性白血病C1498

YS1915B16F10OVA(OPT)小鼠黑色素瘤細(xì)胞熒光素酶標(biāo)記-OVA雞基因修飾B16F10OVA(OPT) 

YS1916SCC7小鼠頭頸鱗癌細(xì)胞SCC7

YS1917GT11小鼠垂體瘤細(xì)胞GT11

YS1918GT17小鼠垂體瘤細(xì)胞GT17

YS1919DC24小鼠樹突狀細(xì)胞DC2.4

YS1920MN9D小鼠中腦多巴胺能神經(jīng)元細(xì)胞MN9D

YS1921CHOK1倉鼠卵巢細(xì)胞CHOK1

YS1922HEIOC1小鼠耳蝸毛細(xì)胞HEIOC1

YS1923CTLL2小鼠T淋巴細(xì)胞CTLL2

YS1924E0771小鼠髓樣乳腺癌細(xì)胞E0771

YS1925moc1小鼠口腔鱗狀細(xì)胞moc1

YS1926moc2小鼠口腔鱗狀細(xì)胞moc2

YS1927min6小鼠胰島β細(xì)胞min6

YS1928LA795小鼠肺癌細(xì)胞-腺癌LA795

YS1929hep534小鼠肝癌細(xì)胞hep53.4

YS1930CMT6461小鼠肺腺癌細(xì)胞CMT6461

YS1931MELorMEL745AclDS19小鼠紅白血病細(xì)胞MELorMEL745Acl.DS19

YS1932JAWS2小鼠骨髓未成熟樹突狀細(xì)胞JAWS2

YS1933MCA205小鼠纖維肉瘤細(xì)胞MCA205

YS1934NIH3T3/RFP小鼠胚胎細(xì)胞NIH3T3/RFP

YS1935YUMM17小鼠黑色素瘤細(xì)胞YUMM1.7

YS1936MC38OVA小鼠結(jié)腸癌細(xì)胞-OVA雞基因修飾MC38OVA

YS193715P1小鼠睪丸上皮細(xì)胞15P1

YS1938AtT20小鼠垂體瘤細(xì)胞AtT20

YS1939cmt93小鼠結(jié)直腸癌細(xì)胞cmt93

YS1940L6565小鼠白血病細(xì)胞L6565

YS1941Y1[Y1]小鼠腎上腺皮質(zhì)瘤細(xì)胞Y1[Y1]

YS1942CFSC8B大鼠永生型肝星狀細(xì)胞CFSC8B

YS1943AR42J大鼠胰腺外分泌腺腫瘤細(xì)胞AR42J

YS1944INS1大鼠胰島細(xì)胞瘤細(xì)胞INS1

YS1945RSC96大鼠雪旺細(xì)胞RSC96

YS1946A7r5大鼠胸大動脈平滑肌細(xì)胞A7r5

更多細(xì)胞請咨詢我們:小鼠雜交瘤細(xì)胞LB3.1ATCCHB298


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