更新時(shí)間：2025-11-20
| 中文名稱(chēng):人角膜內(nèi)皮細(xì)胞HCECB4G12 | 英文名稱(chēng):HCECB4G12 |
| 品牌: 雅吉生物 | 產(chǎn)地: 上海 |
| 保存條件: 無(wú)血清凍存液 | 純度規(guī)格: 99% |
| 產(chǎn)品類(lèi)別: 細(xì)胞 細(xì)胞系 | |
| 貨號(hào): YS2502 | 是否進(jìn)口: 是 |
| 用途: 科研實(shí)驗(yàn) | 產(chǎn)品規(guī)格: 1*10^6/T25 |
| 別名: K1 |
產(chǎn)品名稱(chēng)：人角膜內(nèi)皮細(xì)胞HCECB4G12
傳代方法 | 次建議1:2傳代 | 凍存條件 | 無(wú)血清凍存液（貨號(hào)：C7001） |
細(xì)胞描述 | 本庫(kù)的細(xì)胞僅用于科研工作，未經(jīng)許可不得用于其他目的，使用者不得將本庫(kù)細(xì)胞轉(zhuǎn)讓給第三者。 | ||
培養(yǎng)備注 | 用無(wú)菌離心管收集瓶子培養(yǎng)基，留作過(guò)渡培養(yǎng) | ||
人角膜內(nèi)皮細(xì)胞HCECB4G12到貨后處理
細(xì)胞在培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)至良好狀態(tài)后灌滿培養(yǎng)液并封好瓶口是細(xì)胞運(yùn)輸?shù)霓k法。收到細(xì)胞回到自己的實(shí)驗(yàn)室后，先打開(kāi)外包裝，用75%酒精噴灑整個(gè)瓶消毒后放到超凈臺(tái)內(nèi)，嚴(yán)格無(wú)菌操作，培養(yǎng)箱靜置2-4小時(shí)。鏡下觀察：未超過(guò)80%匯合度時(shí)，可將瓶裝的培養(yǎng)液收集至離心管中，加入6ml培養(yǎng)基，放入37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)；超過(guò)80%匯合度時(shí)，根據(jù)情況傳代或者凍存，具體操作見(jiàn)細(xì)胞培養(yǎng)步驟。（注意發(fā)貨的是密封培養(yǎng)瓶的話，放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)記得培養(yǎng)瓶蓋子擰松，傳代后建議一瓶用原瓶里面的培養(yǎng)基，另外一瓶用自己配的培養(yǎng)基）
人角膜內(nèi)皮細(xì)胞HCECB4G12培養(yǎng)步驟
一、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中），培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
二、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a）、對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細(xì)胞，脫落后吸出，在1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液，將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。
b）、對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄上清液，補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。
PS：若客戶收到2ml小管細(xì)胞，收到細(xì)胞后，用75%酒精噴灑整個(gè)管子消毒后放到超凈臺(tái)或安全柜內(nèi)，嚴(yán)格無(wú)菌操作；將小管細(xì)胞轉(zhuǎn)移至T25培養(yǎng)瓶或6cm培養(yǎng)皿，加入5ml左右培養(yǎng)基混勻，放入培養(yǎng)箱過(guò)夜培養(yǎng)后查看細(xì)胞密度：若密度未超過(guò)80%，換液繼續(xù)培養(yǎng)，視情況傳代或者凍存。若密度超過(guò)80%，可直接進(jìn)行傳代（方法同上）。
三、細(xì)胞凍存：（注：無(wú)血清凍存液凍存細(xì)胞的方法請(qǐng)參考我司貨號(hào)：C7001）
1、細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時(shí)，棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2、添加0.25%消化液約1ml至培養(yǎng)瓶中，倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后加入培養(yǎng)液終止消化，輕輕吹打細(xì)胞使之脫落，然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中，1000rpm離心5min；
3、用適量的凍存液重懸細(xì)胞，并放置于凍存管中；
4、先將細(xì)胞凍存管放置于-20℃ 1.5h，然后將其移入-80℃
人角膜內(nèi)皮細(xì)胞HCECB4G12部分相關(guān)細(xì)胞如下：
YS2487UPCISCC172人舌頭鱗癌細(xì)胞UPCISCC172
YS2488stage3ANCIH1373人肺腺癌細(xì)胞stage3ANCI-H1373
YS2489SW1710人膀胱癌細(xì)胞SW1710
YS249012Z人源子宮內(nèi)膜異位細(xì)胞12Z
YS2491Y1小鼠腎上腺皮質(zhì)瘤細(xì)胞Y1
YS2492PIG3原代人皮膚黑色素細(xì)胞PIG3
YS2493P3ag小鼠骨髓瘤細(xì)胞P3ag
YS2494KM12SM人結(jié)腸癌肝轉(zhuǎn)移細(xì)胞KM12SM
YS2495MAc小鼠小腦星形膠質(zhì)細(xì)胞MAc
YS2496NKT自然殺傷T細(xì)胞NKT
YS2497MH7A關(guān)節(jié)炎成纖維細(xì)胞MH7A
YS2498RAFLSs類(lèi)風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎成纖維樣滑膜細(xì)胞RAFLSs
YS2499WM239A人黑色素瘤細(xì)胞WM239A
YS2500GP5D人結(jié)腸腺癌細(xì)胞GP5D
YS2501TGBC11TKB人胃癌細(xì)胞TGBC11TKB
YS2502HCECB4G12人角膜內(nèi)皮細(xì)胞HCECB4G12
YS2503FRTL5大鼠甲狀腺細(xì)胞FRTL5
YS2504MCA38小鼠結(jié)腸癌細(xì)胞MCA38
YS2505SMC1人胸膜間皮瘤細(xì)胞SMC1
YS2506HOEC人口腔上皮HOEC
YS2507HKF人成纖維細(xì)胞HKF
YS2508CCCHSF1人皮膚成纖維細(xì)胞CCCHSF1
YS2509MLM小鼠急性粒白血病細(xì)胞MLM
YS2510EJ138人膀胱癌EJ138
YS2511N9小鼠小膠質(zhì)細(xì)胞N9
YS2512BCPAPBCPAP甲狀腺乳頭狀癌細(xì)胞BCPAPBCPAP
YS2513NCIH1672小細(xì)胞肺癌細(xì)胞NCIH1672
YS2514HSC4人口腔鱗癌細(xì)胞HSC4
YS2515CEK雞胚腎細(xì)胞CEK
YS2516NCIH1770人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞NCIH1770
YS2517NCIH1092人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞NCIH1092
YS2518FLS大鼠成纖維樣滑膜細(xì)胞FLS
YS2519HFL人成纖維樣滑膜細(xì)胞HFL
YS2520HN13人口腔鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞HN13
YS2521MCFs小鼠心肌成纖維細(xì)胞MCFs
YS2522EHEB人慢性B細(xì)胞白血病細(xì)胞EHEB
YS2523SNK6人NK/T細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞SNK6
YS2524hTERTRPE1人視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞hTERTRPE1
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